【用户成果】Sony ID7000™助力免疫信号调控研究

• CD27与CD70结合后，通过网格蛋白介导的内吞（CME）迅速内化，随后通过溶酶体和蛋白酶体途径降解。

• 内吞依赖αCD3共刺激，且在记忆T细胞亚群中内吞效率降低。

图1.CD70配体结合诱导表面CD27受体快速下调。

• CD27内吞后募集TRAF2和磷酸酶SHP-1，抑制Lck激酶（TCR信号关键分子）的Y394位点磷酸化，从而减弱ERK1/2和AKT信号。

• 该调控依赖于SHP-1活性，CRISPR敲除SHP-1后CD27对ERK的抑制作用消失。

图2. CD27-TRAF2-SHP-1调节αCD3+αCD28诱导的Lck和下游信号传导。

• CD27共刺激延缓细胞周期进入，促进TCF1⁺、CD45RA⁺、CCR7⁺的记忆T细胞表型。

• CD27激活的T细胞糖酵解水平较低，但线粒体呼吸能力增强，代谢特征更接近记忆T细胞。

图3. CD27共刺激促进记忆特征。

• 单细胞多组学分析显示，CD27共刺激诱导FOXP1、TCF7、STAT1等记忆相关转录因子网络，抑制效应分化相关基因（如IL2、IFNγ）。

• ATAC-seq表明CD27信号维持染色质开放性，增强记忆相关基因的调控元件可及性。

图4. CD27共刺激在T细胞活化后早期诱导不同的基因调控回路。

• CD27共刺激的CAR-T细胞在慢性抗原刺激模型中持久性更强，B细胞再生障碍维持更久。

• 在实体瘤模型中，CD27共刺激的CAR-T细胞连续杀伤能力增强，抑制标志物（TIM3、TIGIT）表达更低。

图5. CAR-T细胞在制造过程中的CD27共刺激改善了体内功能。

方法：使用抗CD27抗体（克隆MT-271）结合不同激活条件（αCD3/CD28/CD70DT），通过流式检测CD27内吞速率。

结果：CD70DT诱导剂量依赖性CD27内吞，5分钟内表面表达显著下降，24小时后出现28 kDa裂解产物。

方法：CFSE稀释法评估增殖；7-AAD染色分析细胞周期；表面标记（TCF1、CD45RA、CD127）检测记忆表型。

结果：CD27共刺激延迟细胞周期进入（48小时S/G2+M比例较低），但9天后扩增的T细胞中TCF1⁺比例显著高于CD28共刺激组。

方法：固定/透膜后，使用抗p-ERK（T202/

Y204）、p-Lck（Y394）抗体进行胞内染色。

结果：CD27共刺激显著降低ERK和Lck磷酸化水平，SHP-1抑制剂可逆转此效应。

CD27信号通过TRAF2-SHP-1轴动态调控TCR/CD28信号强度，平衡效应与记忆分化。CD27共刺激的CAR-T细胞具有更强的持久性和抗肿瘤活性，尤其在慢性抗原和实体瘤模型中表现突出。靶向CD27的信号调控为优化T细胞疗法（如减少耗竭、增强记忆）提供了新策略，可能改善临床疗效。

意义：本研究揭示了CD27在T细胞命运决定中的核心机制，为设计新型CAR-T制备方案提供了理论依据，具有重要转化价值。

Reference：

Signaling via a CD27-TRAF2-SHP-1 axis during naive T cell activation promotes memory-associated gene regulatory networks. Immunity. 2024 Feb 13;57(2):287-302.e12. doi: 10.1016/j.immuni.2024.01.011.