简 介
QPix 微生物克隆筛选系统采用先进的技术来减少人工或实验室内的手动重复性任务。它被广泛用于快速、准确、高效地筛选基因文库。根据药品生产质量管理规范 (GMP)标准，生物制剂生产的一个关键要求是确保无菌以防止交叉污染。本研究旨在证明使用 QPix 420 系统进行自动菌落挑选和铺板过程中的无菌性。该系统具有多种灭菌功能，包括用于内部消毒的紫外线、挑针洗槽和高温卤素灯干燥。这些特性不仅符合 GMP 标准，而且通过挑针的可重复使用性提供经济效益。在每次拣选过程中，挑针都经过多个清洗步骤，在三个洗涤槽中彻底冲洗以去除微生物残留物，然后通过卤素灯干燥进行灭菌。
优 势
菌落采集与铺板过程保持无菌操作，符合 GMP 标准。
通过消毒针的可重复使用性，显著降低使用成本。
高通量和准确筛选微生物克隆，提高实验室效率和生产力。
提供应用灵活性，在微生物学领域支持快速筛选。
挑 取
方法
使用表 1 中描述的样品、菌针类型和消毒程序进行菌落挑选。每个实验都包括用消毒针接种的对照孔，然后用消毒针接种到另一个孔中 ( 图 1，红色孔 )。所有目的板 (96 孔微孔板 ) 在 37℃ 下搅拌培养过夜后都进行了细菌生长分析。这些数据来自多个 QPix 420 系统的验证研究，根据对照孔 ( 图 1，分别为绿色和红色孔 ) 中是否存在有活力的生物样本，来评估 QPix 消毒循环的效率。
表 1
图 1 对照孔：45 个，这些孔用先前采摘过菌落的针接种这些孔，将其先放入 1 号终板，并进行消毒程序，再接入 2 号终版。
结果
在不同的 QPix 仪器中，共有 497 个对照孔接种，无交叉污染 ( 表 2)。
表 2
涂布
方法
QPix 400 系列还能自动将样品涂布到装有琼脂的托盘上。96 孔微孔板中的液体样品可以转移至琼脂表面，从而在 30 分钟内自动完成多达 96 个样品的涂布。涂布使用表 3 中列出的参数进行。每次运行采用接种源孔 ( 图 2，绿色孔 ) 和纯 LB 培养基源孔 ( 图 2，黄色孔 )。每次实验都包括对照区，对照区用之前涂布过生物样本的针进行消毒，然后用它再次对这个区域用 LB 培养基进行涂布 ( 图 2，红色为对照区 )。在 37° C 下培养过夜后，对所有目的平板的生长情况进行分析。对照区域中是否存在可存活的生物样本，来评估 QPix 消毒循环的效率。
图 2 对照区域：8( 红色 )。这些区域使用 LB 培养基进行划线，使用的涂布头之前曾在接种过的样品上进行涂布，并进行了消毒程序。
表 3
结果
对于每台 QPix 仪器，8 个对照区域共接种 80 个区域，且无检测到交叉污染 ( 表 4 )。
表 4
总 结
先进的算法有助于快速鉴定和高通量挑选具有所需表型的微生物菌落。优化的菌种特异性挑针确保高效、准确的菌落采集，效率超过 98%。QPix 模块化系统的多功能性支持微生物学研究的通量扩展，有效消除交叉污染的风险。
关于美谷分子仪器
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