【文献分享】Sony SH800实现外囊泡高分泌细胞分选，助力优化细胞治疗

内容摘要

细胞外囊泡（EVs）作为一种新兴的治疗媒介，因其在细胞间通讯和促进组织再生中的重要作用而备受关注。然而，临床转化中缺乏富集高EVs分泌细胞的方法，限制了EVs在治疗中的应用。近期，Dino Di Carlo团队利用纳米瓶（nanovial）结合Sony SH800，基于EVs分泌水平对单个细胞进行分选，成功筛选出具有高EVs分泌能力的间充质干细胞（MSCs），并验证了这些细胞在心肌梗死模型中的治疗效果。该项工作发表在Nature Communications期刊^【1】。值得一提的是，该团队利用nanovial搭配索尼流式分选仪SH800已开展过多项基于分泌产物特征分析的细胞分选研究^【2，3】。

图1. 基于细胞外囊泡分泌量的细胞分离与下游分析概述

由于缺乏有效的表面靶标来标记高EVs分泌细胞，Dino Di Carlo团队开发了一项基于nanovial结合流式的细胞分选技术，该技术能够根据EVs的分泌水平对单个细胞进行分选。首先通过微流控装置生成PEG纳米瓶，其内腔包被了生物素化的明胶，可捕获锁定细胞及其分泌的EVs。然后利用CD63和CD9特异性捕获和标记EVs，通过索尼全自动流式分选仪SH800分别对高分泌和低分泌的细胞进行分选。

图2. 利用纳米瓶和流式技术分析和分选EV分泌的单细胞

通过nanovial+Sony SH800筛选出的高分泌型间充质干细胞（MSCs）展现出与EV生物合成和血管再生相关的特定转录组特征。利用10X Genomics Chromium系统对这些细胞进行单细胞基因表达分析，结果显示高分泌MSCs在EV生物合成、干细胞增殖以及组织再生信号方面具有更高的表达水平。这些发现揭示了高分泌MSCs在再生医学中的潜在治疗价值。

图3. 心肌梗死模型中高EV分泌与低EV分泌的MSC治疗潜力比较

研究者们进一步将基于EVs分泌水平筛选的MSCs应用于小鼠心肌梗死模型中，以评估其治疗效果。结果显示，与低分泌MSCs相比，高分泌MSCs治疗组在心脏功能恢复、组织重塑以及减少梗死面积方面表现出显著的改善。这些结果支持了EVs分泌是再生细胞治疗中一个重要的治疗因素，并表明基于EVs分泌的细胞选择可以增强治疗效果。

索尼流式 

在本研究中，Sony Sorter SH800发挥了至关重要的作用。通过使用130微米芯片，Sony Sorter SH800能够精确处理大量的纳米瓶微粒，从而实现对数以百万计的单个MSC细胞的快速高活性分选，从而满足下游单细胞组学研究需求。这种高精度、高活性、高通量的分选能力，使得研究者能够从大量细胞中筛选出具有高EVs分泌能力的MSCs，为后续的再生医学研究和细胞治疗提供了强有力的工具。