肺巨噬细胞和树突状细胞(DC)亚群的积累与表型变化显示出模型和亚群的特异性。通过运用索尼ID7000™全光谱细胞分析仪,研究人员对肺部不同巨噬细胞和DC亚群的积累及表型变化进行了全面评估,证实了该技术在分析肺部炎症条件下细胞群体方面的应用价值。该研究提供了两种不同自身免疫性炎症(AAI)模型中关键炎症细胞以及巨噬细胞和DC亚群的全面分析,为深入探究相关机制奠定了基础,并助力研究人员根据目标人群和科学假设选择适宜的实验模型。
模型相关免疫细胞变化
OVA(卵清蛋白)
诱导的AAI模型
肺泡巨噬细胞(AMs):肺泡巨噬细胞数量有所增加,且MHCII表面表达增加。
间质巨噬细胞(IMs):CD11c+ IMs数量显著增加,而CD11c- IMs数量也显著增加,但MHCII表达在这两亚群中未显著变化。
神经相关巨噬细胞(NAMs):NAMs数量显著增加,但MHCII表面表达未变化。
树突状细胞(DCs):CD103+和CD11b+ DCs数量显著增加,但激活标志物CD80和CD86的表达未显著变化。
单核细胞(Monocytes):Ly6C+单核细胞数量显著增加,而Ly6C-单核细胞数量无显著变化。
HDM(屋尘螨)
诱导的AAI模型
肺泡巨噬细胞(AMs):肺泡巨噬细胞数量显著增加,且MHCII表面表达增加。
间质巨噬细胞(IMs):CD11c+ IMs数量显著增加,而CD11c- IMs数量无显著变化。
神经相关巨噬细胞(NAMs):NAMs数量显著增加,但MHCII表面表达未变化。
树突状细胞(DCs):CD103+和CD11b+ DCs数量显著增加,且这些DCs的激活标志物CD80和CD86表达显著增加。
单核细胞(Monocytes):Ly6C+和Ly6C-单核细胞数量均显著增加。
气道中的白细胞介素-4(IL-4)显著增加,但血清中总IgE水平下降。
光谱流式方案和各亚群识别
荧光抗体组合
各免疫亚群的识别
代表性数据
流式门控策略
补充图2. 展示了肺分离细胞的流式细胞术门控策略,通过排除双细胞和死细胞后,对活单个CD45+细胞进行MerTK+/CD64+门控,进而细分为AM、IMs、DCs、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞等亚群,并最终识别出单核细胞衍生的巨噬细胞和树突状细胞。
UMAP聚类免疫细胞亚群
图5. 比较了OVA-AAI和HDM-AAI模型中肺部特定免疫细胞亚群的积累差异,并展示了通过UMAP聚类和手动门控识别的免疫细胞亚群分布和数量。
总结
本研究通过多参数光谱流式细胞术对实验性过敏性气道炎症(AAI)中的关键炎症细胞、巨噬细胞和树突状细胞(DC)群体进行了全面分析,揭示了不同亚群在炎症诱导和维持中的特定作用,并强调了在选择适合特定研究问题的实验模型时考虑模型特异性的重要性。
赋予深度科学洞察力
索尼ID7000™全光谱细胞分析仪赋予了科研人员深度的科学洞察力,它通过提供关于异质细胞群体的全面信息,支持高参数流式细胞术,并具有高灵敏度以检测微弱和稀有的细胞群体。该设备能够扩展细胞分析的能力,可以配置多达7个激光器和186个检测器,是目前市场上任何流式细胞仪中配置最多的。这使得研究人员能够进行50c+的实验,其限制仅在于可用的荧光素。ID7000™的激光选择范围广泛,从深紫外线(320nm)到红外(808nm)。系统的检测能力不仅支持多色方案的扩展,还能适应未来荧光素技术的发展。
更详细的产品信息可参考:
https://www.sonybiotechnology.com/us/instruments/id7000-spectral-cell-analyzer/
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